期刊简介
《口腔生物医学》(季刊)创刊于2010年,是由南京医科大学主办的医学刊物。主要内容为介绍国内、外最新的口腔医学基础与临床研究成果和经验,注重论文的科学性、创新性、实用性,突出理论与临床相结合,普及与提高相结合。适合各级口腔科医生及教学、科研人员参阅。
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- 杂志名称:口腔生物医学杂志
- 主管单位:江苏省教育厅
- 主办单位:南京医科大学
- 国际刊号:1674-8603
- 国内刊号:32-1813/R
- 出版周期:季刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏
白念珠菌RAS1基因高表达菌株的构建及鉴定
章珍珍;夏金萍;马鸣;魏昕
关键词:白念珠菌, RAS1基因, 高表达
摘要:目的:构建白念珠菌RAS1基因高表达菌株pCaEXP?RAS1?CAI4。方法:将白念珠菌RAS1基因的开放阅读框( ORF)置于高表达载体pCaEXP的启动子MET3之后,构建高表达质粒载体pCaEXP?RAS1。将整合的重组质粒转化进入大肠杆菌DH5α,经扩增后采用质粒抽提试剂盒大量制备pCaEXP?RAS1质粒。单酶切线性化质粒,将线性化的pCaEXP?RAS1经醋酸锂法转化入白念珠菌CAI4细胞内,随后在SD?ura?met?cys选择性培养基获得转化子,构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。挑取单克隆菌落,经菌落PCR验证阳性转化子,并采用实时定量PCR检验RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平。结果:酶切及测序鉴定表明高表达质粒载体pCaEXP?RAS1构建成功,实时定量PCR检验转化子RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平,表明pCaEXP?RAS1?CAI4菌株构建成功。结论:通过高表达质粒载体pCaEXP?RAS1可以成功构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。
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