BMP-2促进人炎症牙髓干细胞骨向诱导分化的体外研究

摘要：目的：研究人骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein，BMP-2）对人炎症牙髓组织来源的牙髓干细胞（dental pulp stem cells from inflamed pulps，DPSCs-IPs）体外骨向诱导分化的影响。方法：取第三代 DPSCs-IPs，按是否于培养基中加入 BMP-2分成：BMP-2＋DPSCs-IPs 组（实验组）和 DPSCs-IPs 组（对照组）。无成骨诱导条件培养1周后，对各组分泌的胶原基质行 Tri-chrome 染色，观察并比较实验组和对照组之间的骨向诱导分化情况；实时定量 RT-PCR 检测二者的Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ，COL-Ⅰ）mRNA 表达情况。在成骨诱导条件下，培养3周后对各组分泌的钙化基质行 Von Kossa 染色，通过实时定量 RT-PCR 检测转录因子及成骨相关基因的表达。结果：无成骨诱导培养1周后，实验组 DPSCs-IPs 分泌的胶原基质 Trichrome 染色较对照组深， COL-ⅠmRNA 的表达水平显著上调（P ＜0．05），说明 BMP-2可诱导 DPSCs-IPs 沉积更多的胶原基质；成骨诱导培养3周后，相对于对照组，实验组 DPSCs-IPs 沉积了更多的钙化基质，Nanog、八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）、性别决定区因子（SRY-related high-mobility group box 2，Sox2）等转录因子表达升高，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、骨钙素（osteocalcin，OCN）、骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP），牙骨质蛋白1（cementum protein 1，CEMP-1）、COL-Ⅰ等成骨相关基因表达水平显著上调（P ＜0．05）。结论：BMP-2在成骨诱导条件下可促进 DPSCs-IPs 进行体外骨向诱导分化。