期刊简介
《口腔生物医学》(季刊)创刊于2010年,是由南京医科大学主办的医学刊物。主要内容为介绍国内、外最新的口腔医学基础与临床研究成果和经验,注重论文的科学性、创新性、实用性,突出理论与临床相结合,普及与提高相结合。适合各级口腔科医生及教学、科研人员参阅。
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- 杂志名称:口腔生物医学杂志
- 主管单位:江苏省教育厅
- 主办单位:南京医科大学
- 国际刊号:1674-8603
- 国内刊号:32-1813/R
- 出版周期:季刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏
采用酵母表达载体pWX530构建表达人重组牙骨质蛋白1
欧伟;刘玉;孙卫斌;杨建良;Xuebin Yang;David Wood
关键词:牙骨质蛋白1, 真核表达载体, 酵母
摘要:目的:构建含人重组牙骨质蛋白1(recombination human cementum protein 1,rhCEMP1)基因的真核表达载体,观察其在酿酒酵母细胞中的表达.方法:采用PCR方法扩增rhCEMP1基因,利用定向克隆技术将rhCEMP1基因插入到中间载体pTeasy中,再进一步转插入载体pWX530.重组的pWX530-rhCEMP1在大肠杆菌DH5α中扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定所构建的质粒.经鉴定正确的表达载体pWX530-rhCEMP1转入酵母感受态细胞中,酵母经氨基酸营养缺陷型筛选后培养表达.利用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳和酶联免疫吸附测定(ELISA)分析蛋白表达情况,离子交换层析提纯蛋白.结果:构建的重组质粒成功转入酵母细胞,通过SDS-PAGE和ELISA检测rhCEMP1表达成功.结论:成功构建的含rhCEMP1基因的真核表达载体pWX530-rhCEMP1,并能转入酵母细胞中成功表达.
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